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濾(lǜ)光(guāng)片在流式細(xì)胞(bāo)儀(yí)中應用(yòng)
更(gēng)新時間:2024-05-23
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濾光(guāng)片在(zài)流式(shì)細胞儀中(zhōng)應用(yòng)
流式(shì)細(xì)胞儀是測(cè)量染色(sè)細(xì)胞標(biāo)記物熒光(guāng)強(qiáng)度的(dí)細(xì)胞(bāo)分析(xī)儀(yí),是在單個細胞分析和分選基礎(chǔ)上(shàng)發展起來(lái)的(dí)對細(xì)胞(bāo)的物理(lǐ)或化學(xué)性(xìng)質(如大小(xiǎo),內部(bù)結構(gòu),DNA,RNA,蛋白質,抗(kàng)原等)進行(háng)快速(sù)測量並(bìng)可(kě)分類收集的高技(jì)術(shù)儀器。
流動細(xì)胞儀主要(yào)有以(yǐ)下五部分構成:
1. 流動室(shì)及液(yè)流(liú)係統(tǒng)
2. 激光源(yuán)及光(guāng)學係(xì)統(tǒng)
3. 光電(diàn)管和檢(jiǎn)測係統
4. 計算機和分析係統
流動(dòng)室及液流係統
流(liú)動室由樣(yàng)品管(guǎn),鞘液管和噴嘴(zuǐ)等組成,常用光學玻(bō)璃,石英(yīng)等透明,穩(wěn)定(dìng)的材(cái)料(liào)製作。樣品管貯(zhù)放樣(yàng)品,單個細胞懸液在液流壓力(lì)作用下(xià)從(cóng)樣品(pǐn)管射出(chū);鞘(qiào)液由鞘(qiào)液(yè)管從(cóng)四周流向噴(pēn)孔,包圍(wéi)在樣品外(wài)周後從噴(pēn)嘴(zuǐ)射出(chū)。為了(liǎo)保證液(yè)流(liú)是穩(wěn)液(yè),一(yī)般限製液(yè)流速度(dù)υ<10m/s。
激(jī)光源(yuán)及光學(xué)係統(tǒng)
經特異(yì)熒光染(rǎn)色(sè)的(dí)細(xì)胞(bāo)需要(yào)合適的光(guāng)源(yuán)照射激(jī)發才能發出(chū)熒光供收集檢(jiǎn)測。常(cháng)用(yòng)的(dí)光(guāng)源有(yǒu)弧光(guāng)燈和(hé)激光;激光器(qì)又(yòu)以氬(yà)離(lí)子激光器為普遍,也有(yǒu)配和(hé)氪離子激光器(qì)或染料激(jī)光(guāng)器。

在激光(guāng)光源(yuán)和流(liú)動(dòng)室之間(jiān)有兩(liǎng)個(gè)圓柱(zhù)形透鏡,將激光光源(yuán)發出的橫截麵(miàn)為圓(yuán)形的激光(guāng)光束(shù)聚(jù)焦成和細胞(bāo)的(dí)直(zhí)徑相近,在(zài)這種(zhǒng)橢圓(yuán)形(xíng)激光光斑(bān)內激(jī)光能量成正態分(fēn)布,使(shǐ)通(tōng)過激光(guāng)檢測區(qū)的細(xì)胞(bāo)受照(zhào)強度一致。而光(guāng)學(xué)係統則是由若幹(gān)組透鏡,小(xiǎo)孔,濾光(guāng)片組(zǔ)成(chéng),主要作用是(shì)將(jiāng)不同波(bō)長的(dí)熒光信號送到不(bù)同(tóng)的光電倍增(zēng)管。
光(guāng)電管和(hé)檢測係統(tǒng)
經(jīng)熒光染色(sè)的(dí)細胞(bāo)受合(hé)適的光(guāng)激發後所產(chǎn)生的(dí)熒(yíng)光是通(tōng)過光(guāng)電轉(zhuǎn)換器(qì)轉變成電信號而進行測(cè)量(liáng)的(dí)。光電(diàn)倍增管(PMT)最為常用。PMT的響應(yīng)時(shí)間短(duǎn),僅(jǐn)為ns數量級(jí);光譜響應特性好,在200~900nm的(dí)光譜區(qū),光量子(zǐ)產額都比(bǐ)較(jiào)高(gāo)。也有(yǒu)用矽(guī)光(guāng)電(diàn)二極管的,它(tā)在強(qiáng)光下穩(wěn)定性(xìng)比(bǐ)PMT好(hǎo)。
計算機(jī)和分析係(xì)統
經放(fàng)大後(hòu)的電信號(hào)被送往(wǎng)計算機分析(xī)器(qì)。多(duō)道(dào)的道(dào)數是和電信號的(dí)脈衝高度(dù)相對應(yīng)的(dí),也(yě)是和光信號(hào)的(dí)強弱相關的。對應(yīng)道(dào)數年(nián)縱(zòng)坐(zuò)標通(tōng)常(cháng)代表發(fā)出(chū)該(gāi)信號的細胞相(xiāng)對(duì)數(shù)目(mù)。多(duō)道分析(xī)器出來(lái)的(dí)信號(hào)再(zài)經模(mó)-數轉(zhuǎn)換器輸往微機處理器編成數(shù)據(jù)文(wén)件(jiàn)
流式(shì)細(xì)胞(bāo)儀主(zhǔ)要用(yòng)到三類濾光片:
1:長(cháng)波通濾(lǜ)光片(piàn)(LPF)--隻允(yǔn)許特定波(bō)長以上的光(guāng)綫通過;
2:短波通(tōng)濾(lǜ)光(guāng)片(piàn)(SPF)--隻(zhī)允許特定(dìng)波長(cháng)以下的(dí)光綫通過;
3:帶通濾光(guāng)片(BPF)--隻(zhī)允(yǔn)許特定(dìng)波(bō)長的(dí)光綫(xiàn)通(tōng)過(guò)
我(wǒ)司能(néng)提供(gōng)的濾光片產品有(yǒu)熒光(guāng)濾光片,窄(zhǎi)帶(dài)濾(lǜ)光片,帶通濾(lǜ)光片,生化(huà)分析(xī)濾(lǜ)光(guāng)片,長波通濾(lǜ)光片,短波(bō)通(tōng)濾(lǜ)光片(piàn)等,產(chǎn)品主要應用(yòng)於醫療(liáo),生化(huà)等領(lǐng)域。歡迎您(nín)來選購(gòu)!
常(cháng)用(yòng)熒光(guāng)濾(lǜ)光片組合
常(cháng)用窄(zhǎi)帶濾(lǜ)光片產(chǎn)品(pǐn)
常(cháng)用生化濾(lǜ)光片
常用(yòng)長波通濾光(guāng)片
常用短(duǎn)波通濾光片
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